■介质选择、培养和检查

　　同其他无菌检验技术一样，介质灌装中所用介质应是符合药典要求的对各种细菌都有促生长作用的介质，因此，应对选用介质的促生长性进行验证。

　　对于介质灌装单元的培养和检查有以下具体要求：介质培养之前，应去除泄漏或损坏的介质灌装评价单元，并对此去除过程进行记录。对介质灌装的评价单元应至少培养14天（在培养的早期阶段对各单元进行检查，有助于获得初步的结果）。培养温度应适于无菌灌装区域内预期微生物的生长要求。在介质灌装单元的贮存或处置过程中，应使介质与单元内的所有产品表面相接触。培养阶段全部完成后，目测检查介质灌装容器内是否存在微生物生长，并对被污染单元内存在的微生物种类进行识别，以便确定污染的可能来源（对介质灌装单元宜在批中按顺序进行识别，这样有助于识别一个受污染单元被灌装的时间，以便查找污染源）。

　　■培养结果的接受准则

　　ISO13408-1对于介质灌装的结果是否可以接受给出了两个界限：一个为警戒线，一个为措施线。例如当单一介质灌装试验的单元数量为14440时，一次介质灌装运行中污染单元的数量警戒线为3，措施线为9。当介质灌装培养后的污染单元数超过警戒线时，表明生产线的污染率超过了0.05%，即说明污染率还没达到但已接近了0.1%的无菌保证水平，对此应予以警惕（故称之为“警戒线”）。而当培养后的污染单元数超过措施线时，表明生产线的污染率超过了0.1%，说明已不能满足0.1%的无菌保证水平，此时需要对污染原因进行调查，并采取必要的纠正措施（故称之为“措施线”）。根据ISO13408-1的设计，以上两个结论的置信水平均为95%。

　　ISO13408-1强调，不管介质灌装培养中阳性数量（染菌数）有多少，生产企业都应调查微生物污染的来源，从而确保生产环境和产品均无被污染的风险。

　　另外，介质灌装技术的应用依赖于经过良好培训的人员、确定的规程以及设计合理的设备和设施，并在环境监视和人员监视符合要求的基础上进行。