称取0.5 g～2g（准确至0.001g）样品于小烧杯中，加入适量正己烷溶解（约1 mL～10mL），难溶解

的样品可于正己烷中加温溶解。按7.1.1中“慢慢加入到氧化铝层析柱..过滤后待测”操作。

7.1.3 辣椒酱、番茄沙司等含水量较大的样品

称取10 g～20g（准确至0.01g）样品于离心管中，加10mL～20mL水将其分散成糊状，含增稠剂的样

品多加水，加入30mL正己烷：丙酮= 3：1，匀浆5min, 3000rpm离心10min, 吸出正己烷层，于下层再

加入20mL×2次正己烷匀浆，离心，合并3次正己烷，加入无水硫酸钠5g 脱水，过滤后于旋转蒸发仪上

蒸干并保持5分钟，用5mL正己烷溶解残渣后，按7.1.1中“慢慢加入到氧化铝层析柱..过滤后待测”

操作。

7.1.4 香肠等肉制品

称取粉碎样品10g～20g（准确至0.01g）于三角瓶中，加入60mL正己烷充分匀浆5min，滤出清液，

再以20mL×2次正己烷匀浆，过滤。合并3次滤液，加入5g无水硫酸钠脱水，过滤后于旋转蒸发仪上蒸至

5mL以下，按7.1.1中“慢慢加入到氧化铝层析柱中..过滤后待测”操作。

7.2 推荐色谱条件

7.2.1 仪器条件

色谱柱： Zorbax SB-C18 3.5 μm 4.6mm×150mm （或相当型号色谱柱）

流动相：

. 溶剂A 0.1%甲酸的水溶液：乙腈= 85：15

. 溶剂B 0.1%甲酸的乙腈溶液：丙酮=80：20

梯度洗脱：流速:1mL/min 柱温：30℃ 检测波长：苏丹红Ⅰ 478nm ；苏丹红Ⅱ、苏丹红Ⅲ、

苏丹红Ⅳ 520nm ；于苏丹红Ⅰ出峰后切换。进样量10μl。梯度条件见表1。

7.2.2 标准曲线

吸取标准储备液0、0.1、0.2、0.4、0.8、1.6mL ，用正己烷定容至25mL，此标准系列浓度为0、0.16、

0.32、0.64、1.28、2.56μg/mL,绘制标准曲线。

7.3 计算

GB/T 19681—2005

按公式（1）计算苏丹红含量

R=C× V /M ······（1）

R—样品中苏丹红含量，单位为毫克每千克（mg/kg）；

C—由标准曲线得出的样液中苏丹红的浓度，单位为微克每毫升(μg/mL)；

V—样液定容体积，单位为毫升（mL）；

M—样品质量，单位为克（g）。

表1 梯度条件

时间（min） 流动相 曲线

A％ B％

0 25 75 线性

10.0 25 75 线性

25.0 0 100 线性

32.0 0 100 线性

35.0 25 75 线性

40.0 25 75 线性

附录A

（资料性附录）

苏丹红标准色谱图